氨氮的测定--纳氏试剂分光光度法对显色的影响

1、显色剂的显色时间

显色时间的长短对显色有一定的影响，准确掌握显色时间是做好校准曲线的重要环节。多次实验表明，最佳显色时间应为10~30 min内，此时线性关系最好，10 min前显色不完全，显色45 min后，其颜色不稳定，变化较快。应注意的是全部样品以测定上分光操作不超过5min为宜，这就要求每次比色管不能太多，而且动作要迅速，以达到准确、高质的测定效果。

2、显色温度对吸光度的影响

温度影响纳氏试剂与氨氮反应的速度，并显著影响溶液颜色。实验表明，反应温度为25℃时，显色最完全;5~15℃吸光度无显著改变，但其显色不完全;当温度达30℃时，溶液褪色，吸光度出现明显偏低现象，溶液易出现浑浊。因而实验显色温度应控制在20～25℃，以保证分析结果的可靠性。

3、显色时溶液pH值的选择

由氨氦反应原理可知，OH浓度影响反应平衡。纳氏试剂是强碱性溶液，有一定的缓冲能力，当加入纳氏试剂后，显色的pH适宜范围应控制在11.8～13.4，pH低于11.8,不产生颜色反应，pH高于13.4，溶液立即变浑，无法测量吸光度。